ÿþDes protéines non mitochondriales à un transfert Western. Les signaux de basket blanche femme puma bande de PUMA mitochondrial et de PUMA non mitochondrial ont été déterminés par densitomie à l'aide du logiciel NIH ImageJ, comme nous l'avons décrit précédemment [31]. Par la suite, l ampleur de la translocalisation mitochondriale de PUMA, appelée indice mtPUMA, a été calculée à l aide de l équation ci-dessous.Nous avons examiné un panel de huit lignées de cellules GBM et deux lignées de cellules AA pour l'expression de EGFR .

L'a-tubuline a été déterminée en tant que témoin de charge. Lignées cellulaires: 1, UW14; 2, UW281; 3, MGR1; 4, MGR2; 5, MGR3; 6, T98G; 7, U373MG; 8, UW5; 9, UW15; 10, UW19. Toutes sont basket femme puma noir des cellules GBM, à l'exception de MGR1 et UW5, qui sont des cellules AA. (B) Co-expression de EGFRvIII et de protéines pro-apoptotiques dans des xénogreffes de GBM. Trois xénogreffes de GBM exprimant EGFRvIII, à savoir, D-270 MG, D-317 basket femme puma pas cher MG et U87MG-EGFRvIII, ont été examinées pour déterminer les niveaux de EGFRvIII.

Dans ce contexte, l'EGFR activé à la surface des cellules est endocyté et acheminé vers le RE où il s'associe à Sec61beta, un composant du translocon Sec61, puis est rétrotranslocé du RE au cytoplasme en tant que récepteur non lié à la membrane [37] . Nos résultats dans la Fig. S2 dans Données supplémentaires montrent que PUMA interagit principalement avec la protéine EGFR qui n'est basket homme puma pas associée aux membranes plasmiques.

Ensemble, ces résultats indiquent que l'EGFR et l'EGFRvIII coexpriment de manière paradoxale avec des protéines pro-apoptotiques et interagissent spécifiquement avec PUMA dans le GBM humain.En utilisant une cohorte de 101 gliomes et 12 tissus cérébraux normaux, nous avons examiné les taux d'EGFR / EGFRvIII et de PUMA via l'IHC. Les résultats indiquent une corrélation positive significative entre les niveaux d'expression de EGFR / EGFRvIII et de PUMA (p = 0,039). Comme le montre la figure 2a.

Conformément aux résultats de la figure S1, il a été constaté qu'une sous-population de GBM exprimait PUMA, mais pas des niveaux substantiels d'EGFR / EGFRvIII.EGFR / EGFRvIII et PUMA co-expriment dans des échantillons primaires de GBM et l'étendue de la co-expression est significativement corrélée au degré de gliome. de basket noir femme puma manière significative avec PUMA dans les GBM primaires. Une cohorte de 101 gliomes et 12 tissus cérébraux normaux a été soumise à une coloration IHC pour EGFR / EGFRvIII et PUMA.

Effets de la régulation négative de l'expression de PUMA et de l'augmentation de l'expression de EGFRvIII sur l'induction de l'apoptose dans les cellules GBM. L'étendue de l'apoptose est calculée comme suit: (nombre de noyaux apoptotiques) / (nombre total de noyaux). Dans les deux panels, 250 à 300 cellules ont été examinées dans chaque expérience et trois expériences indépendantes ont été menées pour dériver des moyennes et des écarts types.